黃曲霉毒素B1熒光定量檢測試紙條性能評估測試
該產品的最低檢出限(LOD)為μg/kg,最低定量限(LOQ)為μg/kg,線性范圍為μg/kg,線性范圍內的添加***率為,3次重復的變異系數在以內。與其他真菌毒素的交叉反應率均小于5%。該產品具有操作簡便、靈敏準確、快速定量、重現性好等優點,適合用于對糧食谷物飼料中黃曲霉毒素B1的進行快速定量測定。
關鍵詞:黃曲霉毒素B1檢測試紙條;熒光定量免疫層析;黃曲霉毒素B1;糧食谷物飼料
曲霉毒素B1(AflatoxinB1簡寫為AFB1)是二氫呋喃氧雜萘鄰酮的衍生物,含有一個雙呋喃環和一個氧雜萘鄰酮(香豆素),具有強致癌性以及劇毒性,是迄今發現的各種真菌毒素中最穩定的一種。
目前,國標法測定黃曲霉毒素B1采用HPLC法,需要大型的儀器設備,價格昂貴,操作過程復雜、時間較長,且無法在現場和基礎小型實驗室使用。除此之外,也有采用黃曲霉毒素酶聯免疫試劑盒或膠體金快速檢測試紙條用于大量樣品的篩查,操作簡便,檢測快速,成本也較低,但準確性和重復性較差,容易造成假陽性或者假陰性。因此,急需一種既簡便快速,又能準確定量的檢測方法,熒光定量免疫層析正好可以滿足這種需求。
1實驗材料和方法
1.1試劑和材料
除注明外,均為分析純,試驗用水均為UP水。
大米、玉米、小麥、面粉等樣品從超市購得或從企業取樣。麩皮,小麥、面粉等飼料樣品從飼料廠和企業取樣。
1.2儀器與設備
電子天平:Sartorius;
1.3試驗方法
樣品的前***
取具有代表性的待測樣品500g,用小型粉碎機粉碎1min后過20目篩,收集過篩的細小樣品。稱取1.0±過篩的樣品于10mL離心管中,加入5mL提取液,用漩渦混勻儀震蕩5min(或者搖床振蕩10min)后,4000RPM離心1min,取上清。
檢測過程
當檢測值大于50μg/kg時,可用提取液將離心上清液稀釋5倍后再進行檢測,所得讀數值乘以對應的稀釋倍數即為最終的檢驗結果。
2檢測結果分析
2.1線性范圍與檢出
在樣品提取液中,分別添加μg/kg、μg/kg、μg/kg、μg/kg、μg/kg、50.
2.2準確性和重復性分析
在用國標法測定為的不同種類空白樣品中分別添加黃曲霉毒素B1濃度為,,,,,μg/kg的標準品,然后按照黃曲霉毒素B1熒光定量檢測試紙條的檢測方法進行檢測。
檢測結果見表1。
表1不同樣本檢測的準確性和重復性
89%~,3次重復的變異系數在以內。
2.3與色譜方法的對比試驗結果
檢測結果如下:
表2黃曲霉毒素B1熒光定量檢測卡與高效液相色譜法檢測值對比
89%~,3次重復測定的的CV值在以內。2.4方法特異性
選擇其他5種常見的真菌毒素的標準品在陰性玉米中進行添加,添加的濃度為100μg/kg,然后用飛測生物黃曲霉毒素B1熒光定量檢測試紙條進行測試,每個樣品測3次取平均值;結果顯示與赭曲霉毒素A,伏馬菌素B1,嘔吐毒素、T-2毒素、玉米赤霉烯酮交叉反應率均<5%。實驗結果表明,黃曲霉毒素B1膠體金試劑條對伏馬毒素、赭曲霉毒素、黃曲霉毒素、玉米赤霉毒素幾乎無交叉反應,其方法特異性可以能滿足檢測要求。
表3交叉反應率表
3結論
29μg/kg,最低定量限(LOQ)為μg/kg,線性范圍為μg/kg,線性范圍內的添加***率為,3次重復的變異系數在以內。與其他真菌毒素的交叉反應率均小于5%。該方法具有簡便快速、準確可靠、重復性好等特點,可用于不同糧食谷物飼料中黃曲霉毒素B1的快速定量檢測分析。
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飛
測
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狗狗細小試紙的使用方法
細小試紙多少錢,細小試紙是可以檢測出狗狗是否得了細小病毒最常見的東西,但很多人覺得細小病毒是一種很棘手的疾病,因此檢測細小病毒的細小試紙肯定非常貴,而且也不知道買了之后效果如何,所以很多人對于這個還是半知半解的。
細小試紙的準確率:
1、細小試紙是可以測量出小狗的病情,一般國產試紙準確率比較低,使用韓國安杰的試紙準確率會提高,準確率可以提到98%,在很多臨床試驗都在用韓國的安杰試紙來為狗狗測試。
2、細小試紙對于驗血常規來說,準確率就降低了很多。但是這樣的試紙試驗成本低,對于驗血常規來說安全系數要高。還是很受廣大人們的使用的。
細小試紙的使用方法:
1、將采集到的犬類糞便分泌物用棉簽裝到當有新稀釋液的樣品管中攪拌均勻,用吸管抽取上清液。
2、用測試條樣品孔中滴入四滴提取液,并且等待5到10分鐘觀察測試的結果。
3、測試結果中顯示一條紅線為陰性,顯示兩條紅線為陽性。陰性則表示小狗沒有生病,可以放心;陽性的則表示小狗生病了,需要進一步的接受治療。
測細小的試紙多少錢?
最重要的要看你想要哪種,價格都不等。
寵物狗狗疾病檢測方法有哪些
1、第一種是樣品,得需要寵物狗狗1ul的血清或者是血漿,好,這些只能檢測寵物貓的樣品。樣品的話可以在2到8℃的溫度下保存7天。如果需要更長時間的保存那么本土就得在零下20度了。
2、檢測的原理,酶標板中是含有著冠狀的病毒抗原。在檢測的時候是需要從金黃色葡萄球菌中提取一些蛋白A或者是HRP才能結***復合物了。寵物的血清或者是血漿的樣品以及蛋白A酶標記物如果是在一起的話都會從酶標板的孔中孵育出來。假如寵物貓貓的樣品之中存在FCoV抗體的話,這種抗體將很有可能與孔中的一些抗原去結合,最后再與蛋白A酶標記物做重合。剩下的多余酶標記蛋白A就會被完全洗掉的,加入發色底物。這種試劑盒,在特異性和靈敏度上,都非常高,操作方便簡單,只要半個小時就可以知道準確的結果。
細小試紙使用方法以及狗狗疾病檢測方法有哪些
寵物父母在給寵物喂食的時候,寵物不可避免的會患上一些不可預見的疾病,所以這個時候使用狗細小試紙是很有必要的。狗狗微小試紙有什么用?
1.這種微小的試紙全稱叫做全小病毒抗原檢測試劑。使用期限24個月,主要用于檢測寵物疾病。
2.以狗的糞便為收集對象。如果取樣后當天沒有使用,應冷藏保存。測試時,應置于室溫環境中,使測試對象與測試前室溫下的環境溫度相同。
二、寵物狗疾病的檢測方法有哪些
1.第一種是樣本,需要1ul的寵物和狗的血清或血漿。嗯,這些樣本只能用來檢測寵物貓。樣品可以在2-8℃下儲存7天。如果需要保存更長時間,當地溫度會在零下20度。
2.檢測原理。酶標板含有冠狀病毒抗原。需要從金黃色葡萄球菌中提取一些蛋白質A或辣根過氧化物酶才能結***復合物。pet血清或血漿和蛋白A酶標記物的樣品,如果它們在一起,將從酶標記板的孔中孵育。如果寵物貓的樣本中存在FCoV抗體,很有可能這種抗體會與毛孔中的一些抗原發生解離,最終與蛋白A酶標記重疊。剩余的過量酶標蛋白A會被完全沖走,加入顯色底物。該試劑盒特異性和靈敏度非常高,操作簡單,半小時即可知道準確的結果。
在給寵物喂食的過程中,寵物及其父母只有自己能檢測出寵物和狗的疾病,才能保證他們的健康。